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液相色谱仪

仪器结构特点:

液相色谱仪是以液体作为流动相的色谱分离方法

流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用

适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的大分子化合物常温进样不破坏中的大分子化合物

色谱柱类型,流动相比例,操作参数柱温,流动相梯度可优化分离效果

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液相色谱的主要部件有哪些?


液相色谱的部件按流动相流路的顺序:

流动相***真空脱气机(在线脱气装置)***泵(二元泵和四元泵:区分,有几种流动相按一定比例混合)***进样器(手动和自动)***柱温箱***检测器(紫外:朗伯-比尔定律,质谱:荷质比,荧光:跃迁,e-:蒸发光)



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反相液相色谱

柱内填充二氧化硅颗粒,并对其进行改性,通过将长的碳氢链8~18个c原子附着在其表面来实现其非极性。使用极性溶剂,例如水和醇的混合物,。由于极性溶剂和混合物中的极性分子之间具有-的吸引作用,混合物中的极性化合物将更快地通过色谱柱。非极性分子在通过色谱柱的过程中速度会减慢。它们主要通过范德华分散力和疏水作用与烃基形成不同程度的吸引力。它们在水流动相组分中的可溶性也较低,有助于它们与烃基的相互作用。






液相色谱仪常见故障解决方案

如何排除液相色谱仪气泡溢出的故障?

流动相内产生都无法清除不断产生的气泡,主要是因为过滤器长期沉浸于铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%溶液中12~36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续将过滤器浸泡于5%溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至1.0~3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯冲洗半小时即可。








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